經典案例
尋找結腸癌細胞中可能的miRNA-mRNA聯系
研究背景
miRNAs是一類短的非編碼RNA能夠在多種生物過程中介導基因的表達,包括癌變。本研究通過Ago1和Ago2免疫共沉淀實驗研究34、45、103 miRNAs與164、391、81 mRNAs的關系。我們使用RIP-Seq分析,共沉淀得到的RNA進行sRNA與mRNA大規模測序。分析發現,盡管Ago1和Ago2兩者共享一些miRNAs,但對mRNAs的調控可能是不同的。
研究方法
研究結果
1 RIP-Seq分析可能的miRNA-mRNA關聯。A:RIP-Seq分析流程;B:miRNAs qPCR驗證;C:mRNAs qPCR驗證;D:miRNAs 富集倍數分布;E:mRNAs 富集倍數分布;F:miRNAs 總體表達量相關性;G:mRNAs 總體表達量相關性。
2 Ago富集得到的miRNAs與mRNA以及兩者可能的聯系。A,B miRNA、mRNA鑒定所占比例;C,D:重疊部分;E,F:PhastCons分析進化保守位點。
研究結論
Ago1 IP分析發現,基因頻繁的發揮功能,并且受到少量的miRNAs的調控,并且可能是一些更為保守的調控。而Ago1 IP的結果更多的是與信號轉到基因相關,并存在大量的miRNAs結合位點。
參考文獻
Screening for possible miRNA–mRNA associations in a colon cancer cell line. [Gene, 2014]