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取樣說明
細胞樣品 組織樣品 血液樣品 cell-free樣品 RNA提取
一、血清樣品
1、采血后，輕輕將全血滴入潔凈的EP管或者離心管；
2、4℃靜置 3~4 h，可見血塊析出；
3、5000 rpm，4℃離心 10 min，可見淡黃色血清，取出上清后可再3000 rpm，4℃離心 10 min；以最大程度保證血清質量；
4、將血清分裝，液氮速凍，-80℃保存，干冰運輸。
二、血漿樣品
1、用采血針和抗凝管（含 EDTA 或檸檬酸鈉）抽取全血，混勻；
2、4℃靜置 3~4 h，5000 rpm，4℃離心5 min，取上清即為血漿；
3、可將血漿分裝，液氮速凍，-80℃保存，干冰運輸。
三、細胞上清液樣品
1、培養皿的細胞匯合率達到 80%~90%；
2、把原有培養基吸掉，加適當的胰蛋白酶（能覆蓋細胞）進行消化；
3、細胞變圓后加入等體積的含正常血清培養基終止消化；
4、用移液槍吹打細胞，使細胞懸??；1100rpm，離心5min；
5、吸掉上清液，用無 exosome 血清的培養基清洗細胞一次； 1100rpm，離心5min ；
6、吸掉上清液，加入無 exosome 血清的培養基，懸浮細胞；
7、根據細胞種類把細胞傳到幾個培養皿中（收集上清時細胞匯合率為 60%~80%），培養48h~72h 后，收集細胞上清；
8、2000 rpm，離心10min，然后10000 rpm，離心30min，去除細胞或者細胞碎片，取上清；
9、分裝，液氮速凍，-80℃保存。
四、注意事項
1、送樣量：血清/血漿＞4ml，細胞培養上清液＞10ml。
2、血漿樣品不能用肝素抗凝，會影響total RNA的抽提效果。
